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關(guān)于微生物鏡檢的原理!

2021-11-03 16:18:37 3

全康環(huán)保:原生動物與細(xì)菌之間存在相互依存的功能關(guān)系;原生動物個體大,便于觀察;對于環(huán)境變化比細(xì)菌敏感,更早更容易反映環(huán)境的變化。微生物鏡檢中對原生動物的種類組成、數(shù)量、生長和變化狀況的觀察,也能反映出細(xì)菌的生長和變化情況,即間接地評價污水處理過程和處理效果的好壞,起指導(dǎo)生產(chǎn)的作用。

一、鏡檢微生物的分類

1、形態(tài)

原生動物門屬真核原生生物界,是單細(xì)胞的微型動物,由原生質(zhì)和一個或多個細(xì)胞核組成。原生動物和多細(xì)胞動物相同,具有新陳代謝、運動、繁殖、對外界刺激的感應(yīng)性和對環(huán)境的適應(yīng)性等生理功能。原生動物個體很小,長度一般在100~300μm之間。它們都具有細(xì)胞膜。多數(shù)種屬的細(xì)胞膜結(jié)實而富有彈性,從而使原生動物本體保持一定的體形。但也有一些種屬,例如變形蟲,只有一層極薄的原生質(zhì)膜,不能保持固定的體形。原生動物一般具有一個或兩個以上的細(xì)胞核,其形狀多種多樣,它們在其細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生形態(tài)的分化,形成了能夠執(zhí)行各項生命活動和生理功能的胞器。在運動胞器方面有鞭毛、偽足和纖毛;在營養(yǎng)胞器方面有胞口、胞咽和食物泡;用以排出廢料和調(diào)節(jié)滲透壓的胞器有伸縮泡等。有些種類的原生動物的細(xì)胞膜內(nèi)分布著肌絲,具有收縮變形的功能。

2、營養(yǎng)方式

原生動物的營養(yǎng)方式分為以下幾類:①動物性營養(yǎng),以吞食細(xì)菌、真菌、藻類或有機(jī)顆粒為生,絕大多數(shù)原生動物為動物性營養(yǎng),有些具有胞口、胞咽等攝食器;②植物性營養(yǎng),在有陽光的條件下,一些含色素的原生動物可利用二氧化碳和水進(jìn)行光合作用合成碳水化合物,如植物性鞭毛蟲,但種類和數(shù)量都很少;③腐生性營養(yǎng),以死的機(jī)體或無生命的可溶性有機(jī)物質(zhì)為生;④寄生性營養(yǎng),以其它生物的機(jī)體(即寄主)作為生存的場所,并獲得營養(yǎng)和能量。

3、分類

1981年國際原生動物學(xué)會公布了原生動物分類系統(tǒng),其中在水處理中常見的有三類:

①肉足類,其細(xì)胞質(zhì)可伸縮變動而形成偽足,作為運動和攝食的胞器,運動速度達(dá)3μm/s,典型的肉足類為變形蟲屬、簡便蟲屬、表殼蟲屬和鱗殼蟲屬等;

②鞭毛類,具有一根或一根以上的鞭毛。鞭毛長度與其體長大致相等或更長些,是運動器官,鞭毛蟲又可分為植物性鞭毛蟲和動物性鞭毛蟲,常見的植物性鞭毛蟲有滴蟲屬、屋滴蟲屬和眼蟲屬等,常見的動物性鞭毛蟲有波豆蟲屬、尾波蟲屬等,鞭毛蟲的運行速度達(dá)15~300μm/s;

③纖毛類,原生動物周身表面或部分表面具有纖毛,作為行動或攝食的工具,具有胞口、口圍、口前庭和胞咽等司吞食和消化的細(xì)胞器官,分為游泳型和固著型兩種,游泳型包括漫游蟲屬、草履蟲屬、腎形蟲屬、斜管蟲屬等,固著型常見的有鐘蟲屬、累枝蟲屬、蓋蟲屬、聚縮蟲屬、盾纖蟲屬和殼吸管蟲屬等,纖毛類運動速度較快,可達(dá)200~1000μm/s。

二、鏡檢微生物與細(xì)菌的關(guān)系

1、活性污泥的基本特征

活性污泥是污水活性污泥處理系統(tǒng)的反應(yīng)工作主體,是由細(xì)菌、微型動物為主的微生物與懸浮物質(zhì)、膠體物質(zhì)混雜在一起所形成的絮狀體顆粒。良好的活性污泥具有很強(qiáng)的吸附分解有機(jī)物的能力和良好的沉降性能,絮體的大小約為0.02~0.2mm,多為茶褐色,微具土壤味,密度約為1.005g/cm3,含水率99%左右?;钚晕勰嘀猩嬷鞣N微生物,構(gòu)成了復(fù)雜的微生物相。在多數(shù)情況下,活性污泥中的主要微生物是細(xì)菌,伴之以營腐生的原生動物構(gòu)成基本營養(yǎng)層次,然后是以細(xì)菌為食的掠食性原生動物占優(yōu)勢。同時可以查看中國污水處理工程網(wǎng)更多技術(shù)文檔。

2、原生動物與細(xì)菌的功能關(guān)系

在廢水生物處理系統(tǒng)中將污染物質(zhì)降解的主要是細(xì)菌。原生動物與細(xì)菌的關(guān)系主要為:

①掠食關(guān)系,原生動物在食物鏈中處于捕食細(xì)菌的作用。一方面,原生動物通過對細(xì)菌的捕食,能促進(jìn)細(xì)菌的生長,使細(xì)菌的生長能維持在對數(shù)生長期,防止種群的衰老,提高細(xì)菌的活力,而且原生動物活動產(chǎn)生溶解性有機(jī)物質(zhì)(DOM)可被細(xì)菌再利用,促進(jìn)了細(xì)菌的生長;另一方面,原生動物中存在的某些類型(如纖毛類)具有吞食游離細(xì)菌的巨大能力,而游離的細(xì)菌個體小、密度小,較難沉淀,易被出水帶出而影響水質(zhì)。有人證明奇觀獨縮蟲在自然水體中1h能吃3萬個細(xì)菌。Curds等人在曝氣池中接種纖毛類原生動物,出水大為改善。

②絮凝作用,細(xì)菌生長到一定程度后就凝集成絮狀物。這種絮狀物為原生動物提供了著生的環(huán)境,反過來絮狀物上的原生動物能加速絮凝過程。Curds等證明纖毛蟲能分泌兩種物質(zhì),一種稱為P物質(zhì),是一種多糖類碳水化合物;另一種是屬于單糖結(jié)構(gòu)的葡萄糖及阿拉伯糖,表面電荷為負(fù)的懸浮顆粒會吸收這種P物質(zhì),通過懸浮顆粒表面電荷的改變,就使懸浮顆粒集結(jié)起來,形成絮狀物。另外,纖毛蟲還能分泌一種粘液,能把絮狀物再聯(lián)結(jié)起來。原生動物分泌的粘液對懸浮顆粒和細(xì)菌均有吸附能力。這就促進(jìn)了菌膠團(tuán)的形成和處理能力的提高。

三、鏡檢的目的

要了解污水處理過程的變化或處理水的好壞,最好直接研究分析細(xì)菌的生長情況。但是對于細(xì)菌的觀察、分類鑒定的時間很長,不能及時起指導(dǎo)生產(chǎn)的指示和預(yù)報作用。原生動物與細(xì)菌之間存在相互依存的功能關(guān)系;原生動物個體大,便于觀察;對于環(huán)境變化比細(xì)菌敏感,更早更容易反映環(huán)境的變化。直接觀察原生動物的種類組成、數(shù)量、生長和變化狀況,也能反映出細(xì)菌的生長和變化情況,即間接地評價污水處理過程和處理效果的好壞,起指導(dǎo)生產(chǎn)的作用。

四、鏡檢分析方法

1、形態(tài)和生理觀察

采用顯微鏡對污水處理過程中的活性污泥生長、變化進(jìn)行觀察。特別是觀察原生動物的形態(tài)和生理特征。顯微鏡的放大倍數(shù)采用16×10或16×40即可,觀察到的原生動物應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)圖進(jìn)行對照。建議可以采用《淡水微型生物圖譜》上的圖片進(jìn)行比較。通過原生動物的形態(tài)來確認(rèn)其種類和特性,進(jìn)而來分析其所處的生理狀態(tài)或生理階段,這能間接反映活性污泥的特性。

2、數(shù)量分析

建議采用以下簡單易行的方法:用1mL移液管,移取1mL清水到表面皿中。用一橡膠頭小吸管,從表面皿中將1mL水全部吸盡,然后以均勻的速度徐徐滴下,記錄1mL水的滴數(shù),并重復(fù)數(shù)次,以免誤差。用橡膠頭小吸管在反應(yīng)器中取得均勻的混合液,滴一滴于載玻片上,蓋上蓋玻片,用低倍顯微鏡由左到右或由上到下(注意應(yīng)采用相同的方向順序)進(jìn)行原生動物的計數(shù)。應(yīng)把蓋玻片下所有原生動物記錄,并重復(fù)數(shù)次。用一滴混合液中原生動物的記錄數(shù)乘以計數(shù)吸管1mL水的滴數(shù),即為每mL活性污泥混合液的原生動物數(shù)。

五、微生物的指示作用

1、指示活性污泥性質(zhì)

1)污泥惡化

活性污泥絮凝體較小,往往在0.1~0.2mm以下。主要出現(xiàn)以下優(yōu)勢原生動物:豆形蟲屬、腎形蟲屬、草履蟲屬、瞬目蟲屬、波豆蟲屬、尾滴蟲屬、滴蟲屬等。這些都屬于快速游泳型的種屬。污泥嚴(yán)重惡化時,微型動物幾乎不出現(xiàn),細(xì)菌大量分散,活性污泥的凝聚、沉降能力下降,處理能力差。

2)污泥解體

絮凝體細(xì)小,有些似針狀分散。主要的優(yōu)勢原生動物有:變形蟲屬、簡便蟲屬等肉足類。

3)污泥膨脹

活性污泥沉降性能差,SVI值高。由于絲狀菌的大量生長,出現(xiàn)能攝食絲狀菌的裸口目旋毛科、全毛類原生動物及擬輪毛蟲等。

4)污泥從惡化恢復(fù)到正常

通過反應(yīng)參數(shù)和環(huán)境的改變,活性污泥從惡化狀態(tài)恢復(fù)到正常的過渡期常常有下列原生動物出現(xiàn):漫游蟲屬、斜葉蟲屬、管葉蟲屬等,這些都屬于慢速游泳或匍匐行進(jìn)的生物。

5)污泥良好

易成絮體,活性高,沉降性能好。出現(xiàn)的優(yōu)勢原生動物為:鐘蟲屬、累枝蟲屬、蓋蟲屬、有肋盾纖蟲屬、獨縮蟲屬、各種吸管蟲類、輪蟲類、寡毛類等這些均屬于固著性種屬或者匍匐性種屬。

2、指示反應(yīng)操作環(huán)境

1)優(yōu)勢種屬

Modoni在1988年對污水處理廠進(jìn)行這方面的研究,總結(jié)出:高負(fù)荷、曝氣量相對不足時,小鞭毛蟲占優(yōu)勢;過短的水力停留時間,造成小的游泳型纖毛蟲占優(yōu)勢;非常高的負(fù)荷或存在難降解的物質(zhì)時,出現(xiàn)小的裸變形蟲和鞭毛蟲;大量出現(xiàn)匍匐性和固著性纖毛蟲或有殼變形蟲時,表明運行環(huán)境良好,處理效果好。另外有研究證明,溶解氧不足易出現(xiàn)阿托氏菌屬、扭頭蟲屬和新態(tài)蟲屬等;而過分曝氣則出現(xiàn)肉足類及輪蟲類;有機(jī)負(fù)荷很低,出現(xiàn)硝化作用時,能觀察到游仆蟲屬、旋口蟲屬、表殼蟲屬、鱗殼蟲屬及輪蟲等;在除氮污水廠,低負(fù)荷,長水力停留時間及高溶解氧的場合,有殼變形蟲是最好的指示生物。

2)形態(tài)變化

在一定條件下,原生動物能分泌膠質(zhì)并形成膜將蟲體包圍起來,形成孢囊。大多數(shù)孢囊用以保護(hù)蟲體免受不利的環(huán)境因素(如溫度不適,pH值變化,食料短缺等)的影響。待環(huán)境轉(zhuǎn)好時,蟲體能恢復(fù)活力,脫孢而出。同樣,鞭毛蟲的鞭毛在條件不利時,鞭毛消失,條件適宜時,又重新生出。當(dāng)曝氣池中溶解氧降低到1mg/L以下時,鐘蟲生活不正常,體內(nèi)伸縮泡會脹得很大,頂端突進(jìn)一個氣泡,蟲體很快會死亡;當(dāng)pH值突然發(fā)生變化超過正常范圍,鐘蟲表現(xiàn)為不活躍,纖毛環(huán)停止擺動,蟲體收縮成團(tuán)。所以雖然觀察到鐘蟲數(shù)量較大,但蟲體萎靡或變形時,則反映出細(xì)菌的活力在衰退,污水處理效果有變差的趨勢。

3)生殖方式

原生動物的生殖方式有無性生殖和有性生殖。無性生殖即簡單的細(xì)胞分裂,細(xì)胞核和原生質(zhì)一分為二。在營養(yǎng)、溫度、氧等環(huán)境條件良好的場合,原生動物就進(jìn)行連續(xù)的無性生殖。當(dāng)出現(xiàn)有性生殖(接合生殖)時,往往預(yù)示環(huán)境條件變差或種群已處于衰老期。

3、估計有機(jī)負(fù)荷

有機(jī)負(fù)荷的變化會導(dǎo)致原生動物的結(jié)構(gòu)和數(shù)量變化,尤其是纖毛蟲屬。通過觀察微生物的組成和數(shù)量,就能預(yù)測污水廠運行的有機(jī)負(fù)荷。

4、預(yù)測出水水質(zhì)

通過對活性污泥曝氣池中的原生動物的調(diào)查,發(fā)現(xiàn)雖然原生動物對環(huán)境適應(yīng)的范圍較寬,但最合適、數(shù)量最多的是集中在一個狹小的范圍。根據(jù)這一特征,將出水BOD分為4個等級:0~10mg/L,11~20mg/L,21~30mg/L,>30mg/L。在生產(chǎn)運行過程時,只要觀察原生動物的構(gòu)成情況,即可以預(yù)測出水BOD了。實踐證明,有柄纖毛蟲的數(shù)量和質(zhì)量是預(yù)測出水水質(zhì)最重要的原生動物。

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